無(wú)菌室一般是在微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)專辟一個(gè)小房間??梢杂冒宀暮筒AЫㄔ臁C娣e不宜過大,約 4 — 5 平方米即可,高 2.5 米左右。無(wú)菌室外要設(shè)一個(gè)緩沖間,緩沖間的門和無(wú)菌室的門不要朝向同一方向,以免氣流帶進(jìn)雜菌。無(wú)菌室和緩沖間都必須密閉。室內(nèi)裝備的換氣設(shè)備必須有空氣過濾裝置。
在獲得了無(wú)菌環(huán)境和無(wú)菌材料后,還要保持無(wú)菌狀態(tài),才能對(duì)某種特定的已知微生物進(jìn)行研究或利用它們的功能,否則外界的各種微生物很容易混入。外界不相干的微生物混入的現(xiàn)象,在微生物學(xué)中叫做污染雜菌。防止污染是微生物學(xué)工作中十分關(guān)鍵的技術(shù)。一方面是徹底,另一方面防止污染,是無(wú)菌技術(shù)的兩個(gè)方面。另外,還要防止所研究的微生物,特別是致病微生物或經(jīng)過基因工程改造了的本來(lái)自然界不存在的微生物從實(shí)驗(yàn)容器中逃逸到外界環(huán)境中去。為了這些目的,在微生物學(xué)中,有許多措施。
操作過程注意事項(xiàng)
1. 動(dòng)作要輕,不能太快,以免攪動(dòng)空氣增加污染;玻璃器皿也應(yīng)輕取輕放,以免破損污染環(huán)境
2. 操作應(yīng)在近火焰區(qū)進(jìn)行。
3. 接種環(huán)、接種針等金屬器材使用前后均需灼燒,灼燒時(shí)先通過內(nèi)焰,使殘物烘干后再灼燒
4. 使用吸管時(shí),切勿用嘴直接吸、吹吸管,而必須用洗耳球操作。
5. 觀察平板時(shí)不好 開蓋,如欲沾取菌落檢查時(shí),必需靠近火焰區(qū)操作,平皿蓋也不能 大開,而是上下蓋適當(dāng)開縫。
6. 進(jìn)行可疑致病菌涂片染色時(shí),應(yīng)使用夾子夾持玻片,切勿用手 直接拿玻片,以免造成污染,用過的玻片也應(yīng)置于液中浸泡,然后再洗滌。
7. 工作結(jié)束,收拾好工作臺(tái)上的樣品及器材,后用液擦拭工作臺(tái)。
無(wú)菌室外源性污染源,主要是通過門和無(wú)菌室內(nèi)外通道侵入的室外空氣。因此無(wú)菌室的布置通常都采用按照工藝操作的關(guān)鍵程度,潔凈度的高低由里往外逐級(jí)減弱,抵御室外污染空氣的侵入。同時(shí)為物料和人員進(jìn)出無(wú)菌室設(shè)置相應(yīng)的控制措施,例如物料的氣閘、人員的無(wú)菌更衣系統(tǒng)以及室內(nèi)廢棄物傳遞出來(lái)的通道等。無(wú)菌室內(nèi)的污染源,主要來(lái)自于無(wú)菌室內(nèi)必要的操作人員和部分工藝設(shè)備,通常無(wú)菌室內(nèi)操作人員的四周區(qū)域是潔凈度差的區(qū)域,也是無(wú)菌技術(shù)中重要的控制內(nèi)容。